HEMATOLOGI

HITUNG JUMLAH SEL-SEL DARAH

NO	PERBEDAAN	LEKOSIT	ERITROSIT	TROMBOSIT	EOSINOFIL
1	Pemeriksaan	Hitung jumlah lekosit	Hitung jumlah eritrosit	Hitung jumlah trombosit	Hitung jumlah eosinofil
2	Tujuan	Menghitung jumlah lekosit dalam darah	Menghitung jumlah eritrosit dalam darah	Menghitung jumlah trombosit dalam darah	Menghitung jumlah eosinofil dalam darah
3	Metode	Visual	Visual	Visual	Visual
4	Prinsip	Menghitung jumlah sel lekosit dalam suatu larutan yg telah merusak sel-sel lain  selain sel lekosit	Darah diencerkan dalam larutan yg isotonis untuk memudahkan menghitung eritrosit dan mencegah hemolisis	Darah diencerkan dan dicat dengan larutan REES ECKER lalu dihitung jumlah trombosit dalam volume tertentu	Darah ditambah reagen DUNGER maka sel-sel lain  akan lisis sedangkan eosinofil akan terwarnai sehingga dapat dihitung
5	Bahan	Vena EDTA Oksalat	Vena EDTA Oksalat	Vena EDTA Oksalat	Vena EDTA Oksalat
6	Alat	Mikroskop Pipet thoma (pipet lekosit) Penyedot Bilik hitung Deglass	Mikroskop Pipet thoma (pipet eritrosit) Penyedot Bilik hitung Deglass	Mikroskop Pipet thoma (pipet eritrosit) Penyedot Bilik hitung Deglass Piring petri Kapas basah	Mikroskop Pipet thoma (pipet lekosit) Penyedot Bilik hitung Deglass Piring petri Kapas basah
7	Reagensia	Lar. TURK	Lar. HAYEM	REES ECKER	DUNGER
8	Harga Normal	4-10rb/mm3	4,5-6jt/mm3	150-400rb/ mm3	50-350/ mm3

HEMOSITOMETER:

A.  Kamar Hitung

B.  Pipet Thoma

·        Pipet Lekosit

0.5-1-11

Butiran gelas warna putih

Lumen pipet > besar daripada lumen pipet eritrosit

·        Pipet Eritrosit

0.5-1-101

Butiran gelas warna merah

Lumen pipet > kecil daripada lumen pipet lekosit

C.  Hemometer:

·        Pipet Hb (0.02 ml / 20 ul)

·        Pengaduk

·        Penyedot

·        Standard warna

·        Tabung pengencer

·        Sikat tabung

·        Pipet tetes

D.  Tabung dan Pipet Wintrobe

1.  HITUNG JUMLAH SEL LEKOSIT

Reagensia:

TURK:

a.    Lar. Gentionviolet 1 % dalam air 1 ml

b.    Asam acetat glacial 1 ml

c.    Aquadest add 100 ml

d.    Saring sebelum dipakai

Cara Kerja:

Mengisi Pipet Lekosit:

a.    Isaplah darah sampai tanda 0.5 tepat

b.    Hapus kelebihan darah yg melekat pada ujung luar pipet

c.    Masukkan ujung pipet ke dalam larutan TURK sambil menahan darah pada garis tanda tadi. TURK dihisap perlahan-lahan sampai garis tanda 11. Hati-hati jangan sampai terjadi gelembung udara.

d.    Angkat pipet dari cairan itu, tutup ujung pipet dengan ujung jari lalu lepaskan karet penghisap

e.    Kocoklah pipet itu selama 15-30 detik

Mengisi Kamar Hitung:

a.    Letakkan kamar hitung yg bersih dan benar dengan kaca penutupnya terpasang mendatar diatas meja

b.    Buang semua cairan yg ada pada batang kapiler (3 atau 4 tetes) dan segeralah sentuhkan ujung pipet itu dengan sudut 30⁰ pada permukaan kamar hitung dengan menyinggung pinggir kaca penutup. Biarkan kamar hitung terisi cairan perlahan-lahan dengan daya kapilaritasnya sendiri

c.    Didiamkan kamr hitung selama 2-3 menit agar lekosit dapat mengendap

Menghitung Jumlah Sel:

a.    Pakailah lensa objektif kecil yaitu dengan pembesaran 10x

b.    Kamar hitung dengan bidang garisnya diletakkan di bawah lensa objektif dan fokus mikroskop diarahkan pada garis-garis bagi itu. Dengan sendirinya lekosit akan jelas terlihat

c.    Hitunglah semua lekosit yg terdapat pada keempat bidang besar pada sudut-sudut seluruh permukan yg dibagi

d.    Mulailah menghitung dari sudut kiri atas, terus ke kanan kemudian turun ke bawah dan dari kanan ke ke kiri lalu turun lagi ke bawah dan dimulai lagi dari kiri ke kanan. Cara seperti ini dilakukan pada keempat bidang besar.

e.    Kadang-kadang ada sel-sel yg letaknya menyinggung garis batas suatu bidang. Sel-sel yg menyinggung garis batas sebelah kiri atau garis atas haruslah dihitung. Sebaliknya sel-sel yg menyinggung garis batas sebelah kanan atau bawah tidak boleh dihitung

Perhitungan:

a.    Jika darah dihisap sampai angka 0.5 dan larutan pengencer sampai angka 11, maka pengencerannya adalah 20x

b.    Jika darah dihisap sampai angka 1 dan larutan pengencer sampai angka 11, maka pengencerannya dalah 10x

Perhitungan:

2.  HITUNG JUMLAH SEL ERITROSIT

Reagensia:

HAYEM:

a.    5 gr Natrium sulfat (kristal)

b.    1 gr Natrium chlorida

c.    0.5 gr Mercuri chlorida

d.    Aquadest add 200 ml

Cara Kerja:

Mengisi Pipet Eritrosit:

a.    Isaplah darah sampai tanda 0.5 tepat

b.    Hapus kelebihan darah yg melekat pada ujung luar pipet

c.    Masukkan ujung pipet ke dalam larutan TURK sambil menahan darah pada garis tanda tadi. TURK dihisap perlahan-lahan sampai garis tanda 101. Hati-hati jangan sampai terjadi gelembung udara.

d.    Angkat pipet dari cairan itu, tutup ujung pipet dengan ujung jari lalu lepaskan karet penghisap

e.    Kocoklah pipet itu selama 15-30 detik

Mengisi Kamar Hitung:

a.    Letakkan kamar hitung yg bersih dan benar dengan kaca penutupnya terpasang mendatar diatas meja

b.    Buang semua cairan yg ada pada batang kapiler (3 atau 4 tetes) dan segeralah sentuhkan ujung pipet itu dengan sudut 30⁰ pada permukaan kamar hitung dengan menyinggung pinggir kaca penutup. Biarkan kamar hitung terisi cairan perlahan-lahan dengan daya kapilaritasnya sendiri

c.    Didiamkan kamr hitung selama 2-3 menit agar eritrosit dapat mengendap

Menghitung Jumlah Sel:

a.    Pakailah lensa objektif kecil yaitu dengan pembesaran 40x

b.    Naikkan kondensor sampai ke tengah

c.    Kamar hitung dengan bidang garisnya diletakkan di bawah lensa objektif dan fokus mikroskop diarahkan pada garis-garis bagi itu. Dengan sendirinya eritrosit akan jelas terlihat

d.    Hitunglah semua eritrosit yg terdapat dalam 5 bidang yg tersusun atas 16 kotak kecil, umpamanya pada keempat sudut bidang sedang ditambah yg di tengah-tengah

e.    Mulailah menghitung dari sudut kiri atas, terus ke kanan kemudian turun ke bawah dan dari kanan ke ke kiri lalu turun lagi ke bawah dan dimulai lagi dari kiri ke kanan. Cara seperti ini dilakukan pada kelima bidang sedang.

f.    Kadang-kadang ada sel-sel yg letaknya menyinggung garis batas suatu bidang. Sel-sel yg menyinggung garis batas sebelah kiri atau garis atas haruslah dihitung. Sebaliknya sel-sel yg menyinggung garis batas sebelah kanan atau bawah tidak boleh dihitung

Perhitungan:

c.    Jika darah dihisap sampai angka 0.5 dan larutan pengencer sampai angka 11, maka pengencerannya adalah 200x

d.    Jika darah dihisap sampai angka 1 dan larutan pengencer sampai angka 11, maka pengencerannya dalah 100x

Perhitungan:

3.  HITUNG JUMLAH SEL TROMBOSIT

Metode:

a.    Visual      : REES ECKER

  BRECHER à Rg. Ammonium oksalat 1 %

b.    Tak langsung : FONIO

Pembahasan Visual

Reagensia:

REES ECKER:

a.    3.8 gr Natrium citrat

b.    2 ml lar. Formaldehida 40 %

c.    30 mg brilliant cresyl blue

d.    Aquadest add 100 ml

e.    Disaring sebelum dipakai

Cara Kerja:

Perhitungan:

4.    HITUNG JUMLAH EOSINOFIL

Ragensia:

DUNGER:

a.    5 ml Eosinofil 2%

b.    5 ml Aceton

Cara Kerja:

Perhitungan:

NO	PERBEDAAN	KADAR HB	HEMATOKRIT	LED
1	Pemeriksaan	Kadar Hb	Penetapan Nilai Hematokrit Darah	Laju Endap Darah
2	Tujuan	Untuk mengetahui kadar Hb pasien	Untuk mengetahui nilai hematokrit darah pasien	Untukmengetahui laju endap darah pasien
3	Metode	Sahli	Mikrometode	Westergren
4	Prinsip	Darah oleh HCl 0.1 N akan diubah menjadi asam hematin yg berwarna coklat. Warna coklat yg terbentuk dibandingkan dengan standard warna	Darah dengan antikoagulan dimasukkan ke dalam pipet kapiler kemudian dicentrifuge selama 3-5menit dengan kecepatan tertentu sehingga terjadi pemadatan sel-sel darah. Tingginya sel darah merah diukur dengan skala hematokrit yg dinyatakan dalam persen terhadap seluruh darah
5	Bahan	Vena Kapiler	Vena	Vena
6	Alat	Hemositometer: Pipet Hb Penyedot Tabung pengencer Pengaduk Standard warna Sikat tabung	Pipet kapiler atau Mikrokapiler Dempul Centrifuge Skala hematokrit	Pipet westergren Spinball Rak/Standard LED
7	Reagensia	HCl 0.1 N Aquadest	EDTA	Na Citrat
8	Harga Normal	Wanita 12-16 gr/dl Pria 14-18 gr/dl	Wanita 37-43vol% Pria 40-48vol%	Wanita ‹ 10mm/jam Pria < 15mm/jam