PEWARNAAN BURRY GINS

A.Tujuan                      : Untuk melihat dan mewarnai kapsul kuman

B. Metode                    : Burry Gins

C. Prinsip                     : Kapsul pada kuman tidak dapat mengikat zat warna,sehingga

                                    pada pemberian cat tinta cina dan carbon fuchsin terlihat

                                    bulatan terang atau transparan dengan latar belakang gelap dan

                                    badan kuman berwarna merah dari fuchsin

D. Reaksi                     : -

E. Bahan                      : Suspensi Kuman*

F. Alat                          :  l. Kaca Benda

                                      2. Kaca Penutup

                                      3. Ose

                                      4. Spritus

                                      5. Pinset

                                      6. Bak Pengecatan

                                      7. Botol Semprot

                                      8. Mikroskop

G.Reagensia                 : 1. Tinta Cina

                                      2. Carbol Fuchsin

H.Cara Kerja               :

                                    1. Bersihkan kaca benda dengan alkohol,lalu difiksasi

                                    2. Panaskan ose sampai membara merah dengan menggunakan spritus

                                    3. Ambil koloni kuman dengan menggunakan ose yang sudah

                                     dipanaskan,lalu oleskan ke kaca benda 3 – 4 mata ose

                                    4. Teteskan satu tetes Tinta Cina

                                    5. Goreskan searah dengan menggunakan kaca penutup

                                    6. Tunggu hingga kering

                                    7. Teteskan dengan Carbol Fuchsin,tunggu 5 menit

                                    8. Cuci dengan air

                        9. Tunggu hingga kering

                        10. Periksa dengan mikroskop dengan perbesaran 100 x

G. Interprestasi Hasil    :  Kapsul : Transparan

                                         Badan Bakteri : Warna Merah

H. Nilai Rujukan             :  -

*Jika bahan pemeriksaan padat (koloni kuman) disuspensikan dulu dengan NaCl 0,85%

PEWARNAAN SEDERHANA

A.Tujuan                      : untuk mengetahui kuman Gram positif (+)

B. Metode                    : langsung

C. Prinsip                     : adanya ikatan ion antara komponen seluler dari bakteri dengan senyawa

                                      aktif dari pewarnaan yang disebut kromogen

D Reaksi                      :

E.. Bahan                     : suspensi kuman

F. Alat                          : l. kaca benda

                                      2. spidol permanent

                                      3. ose bulat

                                      4. api spirtus

                                      5. kapas alkohol

                                      6. pinset

                                      7. bak pengecatan

                                      8. botol semprot

                                      9. mikroskop

G.Reagensia                 : alkohol 70 %

                                      Gram A

H.Cara Kerja               :

                                      1. Disiapkan kaca benda yang bersih dan bebas lemak

  2. Diberi tanda lingkaran dengan spidol permanent pada bagian  

      tengahnya

  3. Diambil bahan dan diletakkan pada kaca benda 3-4 mata ose secara 

      aceptis

  4. Disebarkan dengan cara ose diputar dalam lingkaran searah jarum jam

      yang makin lama makin meluas

  5. Dikeringkan sediaan pada temperatur kamar

  6. Dilakukan fiksasi dengan cara melewatkan kaca benda di atas nyala

      Api

7. Genangi sediaan dengan Gram A selama 3 menit, cuci dengan air

8. Keringkan sediaan dan diamati di bawah mikroskop dengan menggunakan lensa obyektif 100x

G. Interprestasi Hasil    : Bakteri gram positif berwarana ungu

H. Nilai Rujikan            :

PEWARNAAN GRAM

A.Tujuan                     : Untuk membedakan antara kuman Gram Positif dan Gram Negatif

B. Metode                   : Langsung

C. Prinsip                    :Merupakan pewarnaan diferensiasi yang membedakan antara bakteri gram positif dan negatifberdasarkan kemampuan bakteri mempertahankanwarna rosanilin, seperti Kristal violet, methyl violet, setelah proses dekolorisasi dengan aseton atau alcohol.

D.. Bahan                    : Susupensi Kuman

E. Alat                         : l. Kaca Benda

                                      2. Ose Bulat

                                      3. Lampu Spirtus

                                      4. Kapas Alkohol

F.Reagensia                 :  1. Alkohol 70 %

2. Gram A

3. Gram B

4. Gram C

5. Gram D

G.Cara Kerja               :

1.            Buat sediaan dan fiksasi

2.            Genangi sediaan dengan gram A selama kurang lebih 3-4 menit, cuci dengan air

3.            Genangi sedian dengan gram B selama kurang lebih setengah menit, cuci dengan air (berwarna ungu trengguli kotor                akan menjadi kuning kecoklatan)

4.            Lunturkan sediaan dengan gram D selama setngah menit sampai satu menit sampai tidak ada zat warna yang mengalir lagi, cuci dengan air

5.            Genangi sediaan dengan gram D selama 2menit,cuci dengan air

6.            Keringkan sediaan dan sediaan setelah kering siap diperiksa dengan mikroskop dengan menggunakan lensa objektif  100x

H. Interprestasi Hasil    :  Bakteri gram positif berwarana ungu

 Bakteri gram negatif berwarna merah